脾臓は手のひら大の扁平な器官で、左上腹部に位置しています。大きさは約10cm（長さ）、約7cm（幅）、約3cm（厚さ）で、重さは約80〜150gです。脾門以外の全表面は鞘膜（腹膜）で覆われ、その下には結合組織の被膜があります。この被膜の結合組織は脾柱となり、脾臓内に柱状に入り込みます。脾柱と脾柱の間には細網線維が網を形成し、細網組織を形成しています。この網目を脾髄と呼ばれる組織が満たし、被膜、脾柱、細網線維網が脾臓の骨格を形成しています。
脾臓の実質は白色脾髄と赤色脾髄に分けられます。前者は脾（リンパ）小節（マルピギー小体とも言います）、後者はそれ以外の組織です。脾リンパ小節は直径約1mmで脾臓内に点在しており、その構造は一般のリンパ小節と同様で、中心には胚中心があります。
赤色脾髄の構造を理解するために、脾臓に入った血管の経路を追います。脾門から入った脾動脈は脾柱に入り、脾柱動脈となり、次に脾髄に入り、脾リンパ小節を偏心的に通ります。この部分を中心動脈と呼びます。一部の枝は脾リンパ小節内で毛細血管を形成しますが、主流はリンパ小節を出るとすぐに分岐し、筆毛動脈となります。そして、この枝は平滑筋を失い、特殊な細網組織の鞘に包まれた莢毛細血管と呼ばれます。内皮は長い柱状細胞で、鞘を形成する細網組織は細網線維と食作用を有する特殊な細胞からなっています。
細動脈は次に最終毛細血管に移行し、脾洞に開きます。終末毛細血管や脾洞の外は脾索（Bilroth索）と呼ばれ、多数の血球や結合組織細胞を含んでいます。終末毛細血管が静脈洞に直接連絡しているか、一旦脾索に開き、血液が一旦血管外に出た後に脾洞に回収されるかが古くから議論されてきました。前者を閉鎖説、後者を解放説といいます。動物による違いもありますが、現在でも十分な決着は得られていません。しかし、機能的には血液は脾索に入ります。
脾洞は非常に太い静脈性の類似血管で、隙間の多い縦に長い柱状細胞と呼ばれる内皮の外側を輪状線維と呼ばれる細網線維が取り巻いています。したがって、脾洞の壁は血液が容易に通り抜けます。脾索には赤血球、顆粒白血球、リンパ球、形質細胞など、さまざまな種類の細胞がありますが、特に大食細胞の存在が目立ちます。この細胞は血液とともに流れてきた異物や細菌、古くなった赤血球を取り込んで処理します。そして、その抗原刺激を脾リンパ小節のリンパ球に伝えます。
日本人のからだ（村上 弦 2000）によると
計測
日本法医学会課題調査委員会（1992）は脾臓の年齢別重量について詳しく調査しています。年齢別の最大値は男性が19歳で142±39.4 g、女性が16歳で125±42.7gでした。成人140体中、脾臓が200 g以上の例が10体、50 g以下の例が22体存在します（Kikkawa, 1966 a）。脾肥大（脾腫）の定義は必ずしも一定ではなく、上下極を結ぶ長さ(cm)×それに直交する長さ(cm)×0.8（肝炎の場合は0.9）の積で求められるSpleen indexが30以上という提案があります（厚川・久、1990）。
外形，溝
Kikkawa (1966 a)は、140体のサンプルを基に、外形を三角型（脾門を頂点とした平たい三角錐、46.4%）、球型（27.1%）、四角型（直方体に類似、17.9%）、紡錘型（平たい水滴状、5.7%）、その他（凹凸不整形、2.8%）の5型に分類しました。
通常、脾臓全体には1から3本の溝があり、溝がない例はわずか2.1%です。脾臓に溝がある部位は、140例中上縁が97.9%、下縁が45.0%、前端が14.3%、後端が2.1%でした。また、溝の数は上縁では1から8本で、2から3本の例が最も多く、下縁および前端では最大3本で通常は1本のみ、後端では溝があっても1本のみです（Kikkawa, 1966 a）。溝が深い場合は分葉脾と呼ばれます（菊地・吉木，1996）。